提取植物dna步驟（索萊寶試劑盒）

試劑盒提取植物dna已經(jīng)獲得廣泛應(yīng)用。各個(gè)生化試劑廠家也都有了dna提取試劑盒產(chǎn)品。索萊寶作為國(guó)內(nèi)生化試劑供應(yīng)商提供了各類dna提取試劑盒。今天給大家介紹試劑盒提取植物dna步驟。當(dāng)然是以索萊寶產(chǎn)植物基因組dna提取試劑盒產(chǎn)品為例。

使用前先在漂洗液中加入無(wú)水乙醇，加入體積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。

1、植物組織預(yù)處理：取新鮮植物組織（不超過(guò) 100mg）或干重組織（不超過(guò) 20mg），于液氮中充分研磨細(xì)粉狀，讓液氮自然揮發(fā)。

2、將研磨好的植物組織粉末迅速轉(zhuǎn)移到預(yù)先裝有 400ul 溶液 A、20ul RNase A（10mg/ml）和 5ul β-巰基乙醇的離心管中，充分顛倒混勻，室溫放置 10min。

3、加入 140ul 溶液 B，充分顛倒混勻，12000rpm 離心 10min，將上清轉(zhuǎn)移新離心管(約 400-500ul)，注意不要吸入沉淀。

4、加入和上清相同體積的溶液 C，充分顛倒混勻，再加入和溶液 C 相同體積的無(wú)水乙醇，此時(shí)若出現(xiàn)絮狀物，將絮狀物吹散后一起加入吸附柱中，12000rpm 離心 5min，棄廢液，一次加不完可分兩次加入。

注意：如果吸附柱膜呈綠色或離心時(shí)有堵塞現(xiàn)象，可向吸附柱中加入 600ul 無(wú)水乙醇，并適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間。

5、 向吸附柱中加入 600ul 漂洗液(請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇)，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放回收集管。

6、向吸附柱中加入 600ul 漂洗液，12000rpm 離心 1min，棄廢液，將吸附柱放回收集管中， 12000rpm 離心 2min。

7、將吸附柱置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘，否則殘余的乙醇可能會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR 等。

8、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加 50-200ul 經(jīng) 65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置1-5min，12000rpm 離心 2min，即可得到高質(zhì)量的植物基因組 DNA。

9、(可選)離心所得洗脫液再加入吸附柱中，室溫放置 2min，12000rpm 離心 2min。

以上是索萊寶植物基因組dna提取試劑盒使用步驟。如果還有不理解可以索萊寶部分獲取幫助。