簡要介紹核酸電泳的原理

帶電荷的物質(zhì)在電廠中趨向運(yùn)動稱為電泳，核酸電泳通常在瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中進(jìn)行，核酸探針、核酸擴(kuò)增和序列分析等技術(shù)所*的組成部分。那么核酸電泳的原理是什么呢，下面我就就來說一下。

核酸電泳的原理：

1.核酸分子中糖-磷酸骨架中的磷酸基團(tuán)，呈負(fù)離子化狀態(tài)；核酸分子在一定的電場強(qiáng)度的電場中，他們會向正電極方向遷移；

2.電泳中使用無反應(yīng)活性的穩(wěn)定的支持介質(zhì)，電泳遷移率（或遷移速度）與分子大小、介質(zhì)粘度等成反比；

因此，可在同一凝膠中、一定電場強(qiáng)度下分離出不用分子量大小或相同分子量但結(jié)構(gòu)型有差異的核酸分子。

瓊脂糖凝膠電泳原理：

瓊脂糖是從海藻中提取出來的一種線狀高聚物。將瓊脂糖在所需緩沖液中加熱熔化成清澈、透明的溶膠，然后倒入膠模中，凝固后將形成一種固體基質(zhì)，其密度取決于瓊脂糖的濃度。 

將凝膠置電場中，在中性pH值下帶電荷的核酸通過凝膠網(wǎng)孔向陽極遷移，遷移速率受到核酸的分子大小、構(gòu)象、瓊脂糖濃度、所加電壓、電場、電泳緩沖液、嵌入染料的量等因素影響。在不同條件下電泳適當(dāng)時間后，大小、構(gòu)象不同的核酸片段將處在凝膠不同位置上，從而達(dá)到分離的目的。瓊脂糖凝膠的分離范圍較廣，用各種濃度的瓊脂糖凝膠可分離長度為200bp50kb的DNA。 

聚丙烯酰胺凝膠電泳原理：

聚丙烯酰胺凝膠通過丙烯酰胺單體、鏈聚合催化劑N，N，N’，N’-四甲基乙二胺(TEMED)和過硫酸銨以及交聯(lián)劑N，N’-亞甲雙丙烯酰胺之間的化學(xué)反應(yīng)而形成。丙烯酰胺單體在催化劑作用下產(chǎn)生聚合反應(yīng)形成長鏈，長鏈經(jīng)交聯(lián)劑作用交叉連接形成凝膠，其孔徑由鏈長和交聯(lián)度決定。鏈長取決于丙烯酰胺的濃度，調(diào)節(jié)丙烯酰胺和交聯(lián)劑的濃度比例，可改變聚合物的交聯(lián)度。 

聚丙烯酰胺凝膠電泳可根據(jù)電泳樣品的電荷、分子大小及形狀的差別達(dá)到分離目的，兼具分子篩和靜電效應(yīng)，分辨力高于瓊脂糖凝膠電泳?？煞蛛x只相差1個核苷酸的DNA片段。 

聚丙烯酰胺凝膠電泳用于分析和制備長度小于1kb的DNA片段。根據(jù)所要分離的核酸片段大小，可制備不同濃度的凝膠。 

生物大分子在一定pH條件下，通常帶電荷，將其置于電場中，會以一定的速度向與其電荷性質(zhì)相反的電極遷移，遷移速度稱電泳速率。電泳速率與電場強(qiáng)度、分子所帶的靜電荷數(shù)成正比，與分子與介質(zhì)的摩擦系數(shù)成反比。摩擦系數(shù)與分子的大小、構(gòu)型及介質(zhì)的粘度有關(guān)。以上便是核算電泳的原理了。