簡(jiǎn)述溶菌酶的制備及應(yīng)用領(lǐng)域

溶菌酶多以蛋清為原料，用于生化研究，臨床上用于急慢性咽喉炎、扁平苔癬、扁平疣等疾病的治療。通常為白色粉末，溶于水，不溶于丙酮，適pH值為6.5。酸性介質(zhì)中可穩(wěn)定存在，堿性介質(zhì)中易失活。

溶菌酶的制備：

1. 原料處理：新鮮或冰凍蛋清（或蛋殼水）70kg，用試紙測(cè)其pH值，應(yīng)在8.0左右，經(jīng)解凍后通過鉛篩，除去蛋清中的臍帶、蛋殼碎片及其他雜質(zhì)。

2. 吸附：用冰水冷卻并攪拌蛋清，使溫度降到5℃，緩緩加入724樹脂10kg，攪拌，使樹脂*懸浮在蛋清中。保持溫度0-10℃，再繼續(xù)攪拌5h。將蛋清移入冷庫，在0-10℃靜置。

3. 洗滌、洗脫 隔天把上層蛋清清液傾出，下層用清水洗去附著的蛋白質(zhì)，先后共洗四次。后將樹脂抽濾去水分，用24kg0.15M磷酸緩沖液（pH6.5）分三次加入樹脂攪拌，每次攪拌15min后抽濾去水分。然后用10%硫酸銨18kg，分4次洗脫溶菌酶。合并洗脫液，加入32%（重量/體積）固體硫酸銨使含量達(dá)40%，析出白色沉淀。在冷處放置，過濾出沉淀。

4.透析：將沉淀溶解于1.5L蒸餾水中，在冷庫內(nèi)透析24-36h，除去大部分硫酸銨。

5.鹽析：透析完畢，將溶液用濾紙過濾，得澄清透析液。用滴管慢慢加入溶液，使pH上升到8.5-9.0，如有白色沉淀，應(yīng)即離心除去。然后在攪拌下加入3N鹽酸，使溶液pH為3.5。按體積緩緩加入5%固體氯化鈉，生成白色沉淀。在0-10℃冷庫放置48h，抽濾得到溶菌酶沉淀。

6.干燥沉淀內(nèi)加入10倍量0℃無水丙酮，攪拌使顆粒松細(xì)，在冷處靜置數(shù)小時(shí)，濾去丙酮。沉淀用五氧化二磷真空干燥，即得口服或外用溶菌酶粉劑原料。如不用丙酮脫水，可將溶菌酶透析液冷凍干燥可得不含氯化鈉的溶菌酶成品。按蛋清重量計(jì)，收率0.1%。

溶解酶的應(yīng)用領(lǐng)域：

1．溶菌酶是一種無毒、*的蛋白質(zhì)，又具有一定的溶菌作用，因此可用作天然的食品防腐劑。現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)品、肉食品、蛋糕、清酒、料酒及飲料中的防腐；還可以添入乳粉中，使牛乳人乳化，以抑制腸道中微生物的生存，同時(shí)直接或間接地促進(jìn)腸道中雙歧桿菌的增殖。

2．溶菌酶作為一種存在于人體正常體液及組織中的非特異性免疫因素，具有多種藥理作用，它具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤的功效，醫(yī)用溶菌酶其適應(yīng)癥為出血、血尿、血痰和鼻炎等。

3．溶菌酶具有破壞細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的功能，以此酶處理G+細(xì)菌得到原生質(zhì)體，因此，溶菌酶是基因工程、細(xì)胞工程中細(xì)胞融合操作*的工具酶。