小鼠氫化可的松ELISA檢測(cè)試劑盒的試驗(yàn)原理

公司自研究所改制以來(lái)在分子生物學(xué)試劑盒、熒光定量PCR、siRNA載體構(gòu)建、全基因合成拼接、熒光探針修飾、多肽合成、dNTP、Pfu酶、熱啟動(dòng)Taq酶、DNA marker、基因工程、原生質(zhì)體的培養(yǎng)、細(xì)胞融合、單克隆抗體診斷試劑等研究方向作了深入的研究。下面簡(jiǎn)單解說(shuō)小鼠氫化可的松ELISA檢測(cè)試劑盒的試驗(yàn)原理及配備。

小鼠氫化可的松ELISA檢測(cè)試劑盒試劑盒內(nèi)容及其配制：
試劑盒成份 96孔配置 48孔配置
96/48人份酶標(biāo)板 1塊板（96T） 半塊板（48T）
塑料膜板蓋 1塊 半塊
標(biāo)準(zhǔn)品：240ng/ml 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml）
空白對(duì)照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml）
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液 1瓶（8.0ml） 1瓶（4.0ml）
生物素標(biāo)記的抗HYD抗體 1瓶（8.0ml） 1瓶（4.0ml）
親和鏈酶素-HRP 1瓶（12ml） 1瓶（5ml）
洗滌緩沖液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml）
底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）
終止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml）

小鼠氫化可的松ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)原理：
HYD試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知HYD濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品 加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將HYD和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HYD的濃度呈比例關(guān)系。
 

自備材料：
1. 蒸餾水。
2. 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
 

小鼠氫化可的松ELISA檢測(cè)試劑盒樣品收集、處理及保存方法：

1、 血清……操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、 保存……如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。