玻璃紙透析培養(yǎng)觀察法

玻璃紙透析培養(yǎng)觀察法

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⑴ 玻璃紙的選擇與處理：要選擇能夠允許營養(yǎng)物質透過的玻璃紙。也可收集商品包裝用的玻璃紙，加水煮沸，然后用冷水沖洗。經此處理后的玻璃紙若變硬，必定是不可用的，只有那些軟的可用。將那些可用的玻璃紙剪成適當大小，用水浸濕后，夾于舊報紙中，然后一起放入平皿內121℃滅菌30min備用。
⑵ 菌種的培養(yǎng)：按無菌操作法，倒平板，冷凝后用滅菌的鑷子夾取無菌玻璃紙貼附于平板上，再用接種環(huán)沾取少許霉菌孢子，在玻璃紙上方輕輕抖落于紙上。然后將平板置28～30℃下培養(yǎng)3～5天，曲霉和青霉即可在玻璃紙上長出單個菌落（根霉的氣生性強，形成的菌落鋪滿整個平板）。
⑶ 制片與觀察：剪取用玻璃紙透析法培養(yǎng)3～4d 后長有菌絲和孢子的玻璃紙一小塊，先放在50%乙醇中浸一下，洗掉脫落下來的孢子，并趕走菌體上的氣泡，然后正面向上貼附于干凈載玻片上，滴加1～2滴乳酸石炭酸棉藍液，小心地蓋上蓋玻片，注意不要產生氣泡，不要移動蓋玻片，以免搞亂菌絲。
標本片制好后，先用低倍鏡觀察，必要時再換高倍鏡。注意觀察菌絲有無隔膜，有無假根、足細胞等特殊形態(tài)的菌絲。注意其無性繁殖器官的形狀和構造，孢子著生的方式和孢子的形態(tài)、大小等。