抗體洗脫液的原理介紹

抗體洗脫液的原理介紹

    日益增長的抗體使用，研究目的蛋白種類一日千里，那么膜的再使用能夠節(jié)約研究時間，推進研究進程，在不影響實驗準確的前提下，那么在使用的意義是很明顯的。現(xiàn)在這里我來講一下抗體洗脫液--stripping buffer。

    在介紹抗體洗脫液的原理前，先來看看抗原抗體結(jié)合的一些環(huán)境條件吧，通常我們的抗體稀釋液選擇是：TBST和PBST，這里的兩種抗體稀釋液的pH值均在7.4-7.8之間。那么問題就來了，為什么抗體稀釋液的pH值是這樣的呢？

    抗原抗體的結(jié)合反應：抗原與抗體能夠特異性結(jié)合是基于抗原決定簇(表位)與抗體超變區(qū)的溝槽分子表面的結(jié)構(gòu)互性與親合性而結(jié)合的。

一、抗原抗體的結(jié)合力

抗原抗體間結(jié)合為非共價鍵結(jié)合：靜電引力、范登華引力、氫鍵結(jié)合力、疏水作用力

二、抗原抗體的親合性和親合力

親合性是指抗體分子上一個抗原結(jié)合點與對應的抗原表位之間相互適 應而存在的引力，由于抗原抗體的結(jié)合 反應是可逆的，若抗體的親合力高，與抗原分子結(jié)合牢固，不易解離；反 之即容易解離。

三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體

大多數(shù)抗原為蛋白質(zhì)，抗體是球蛋白，它們?nèi)芙庠谒薪詾槟z 體溶液，不會發(fā)生自然沉淀。當抗原抗體結(jié)合后，蛋白質(zhì)由親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體。再加入電解質(zhì)，如 NaCl，則進一步使疏水膠體物相互靠攏，形成可見的抗原抗體復合物。

那么我們破壞這些中作用力，就能是抗原抗體復合物解離。

    抗體洗脫液的原理就是利用強酸環(huán)境下，破壞結(jié)合力等因素，使得抗原抗體復合物變成抗原抗體單體。說道這里，我想大家了解了stripping buffer的作用原理了吧！