內(nèi)毒素鱟實驗，如何消除樣品干擾？

內(nèi)毒素鱟實驗，如何消除樣品干擾？

在鱟試劑檢驗內(nèi)毒素試驗中有些樣品嚴(yán)重干擾鱟試驗生化反應(yīng)，甚使反應(yīng)不能進(jìn)行。這就需要采用特殊方法對樣品進(jìn) 行預(yù)處理。

1 稀釋法

相當(dāng)大一部分樣品的干擾因素在一定濃度下才起作用，把樣品適量稀釋后即可按常規(guī)方法測定。如甘露醇、慶大霉素、人血白蛋白、肝素鈉和維生素 C 等注射液等。

2 加熱法

有些干擾因素為不耐熱的物質(zhì)，將樣品在適當(dāng)溫度下保溫一段時間，即可按常規(guī)方法測 定。如某些血液制品和生物藥品等。

3 調(diào)整 pH 值法

有些樣品 PH 值偏高或偏低，且鱟試劑中 pH 緩沖劑不能將反應(yīng)液調(diào)整正常范圍。這時 可用預(yù)先處理并已確認(rèn)無菌無熱原的鹽酸或氫氧化鈉液調(diào)整樣品液 pH。然后按常規(guī)方法測 定， 如氨基酸注射液。

4 超濾─反沖法

一般中草藥注射液成份復(fù)雜，干擾因素較多，難以用普通方法加以消除，即可用超濾法。

取樣品適量，進(jìn)行超濾，樣品藥液全部壓濾通過濾膜，內(nèi)毒素被阻濾在超濾膜片上，再取少 量無熱原水沖洗濾器、濾膜。卸開濾器，將超濾膜反向放置濾器上，嚴(yán)密固定。再用無熱原 水將內(nèi)毒素從超濾膜上沖一量瓶中，精密加水刻度。沖洗液按常規(guī)方法測定。

5 固體樣品 

若固體樣品為可溶性物質(zhì)，用無熱原水溶解，按上述方法進(jìn)行干擾樣品試驗。

手術(shù)器械、一次性輸液器等固體物品的內(nèi)毒素測定，用適量無熱原水按規(guī)定方法浸泡或沖洗即可。內(nèi)毒素的水溶性較大，器具內(nèi)表面或外表面的內(nèi)毒素經(jīng)適當(dāng)時間、適當(dāng)溫度浸泡 或沖洗，即可溶入液體，按常規(guī)方法測定。

對于復(fù)雜樣品還需將上述各法聯(lián)合應(yīng)用。但不管單獨用其一法，或二法、三法聯(lián)用，在 操作過程中均有可能出現(xiàn)抑制或增敏等干擾作用，使測定濃度高于或低于實際濃度，這時必 須做回收率實驗，并根據(jù)測得的回收率求算內(nèi)毒素。