Bradford蛋白濃度測定試劑盒使用說明

保存條件： G250染色液4℃保存，蛋白標(biāo)準(zhǔn)-20℃保存，本試劑盒自訂購之日起九個月內(nèi)有效。

Bradford蛋白濃度測定試劑盒特點：

1.Bradford蛋白濃度測定試劑盒是根據(jù)目前世界上常用的兩種蛋白濃度檢測方法之一Bradford 法研制而成，實現(xiàn)了蛋白濃度測定的快速，穩(wěn)定和高靈敏度。
2.檢測速度極快，10-20個樣品只需不足10分鐘即可完成。 
3. 靈敏度高，檢測濃度下限達(dá)到25微克/毫升，小檢測蛋白量達(dá)到0.5微克，待測樣品體積為1-20微升。  在50-1000微克/毫升濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。
4.不象一些其它蛋白濃度測定方法（包括Lowry法），Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。樣品中巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M，二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.1%，Triton X-100 低于0.1%，Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢劑的樣品推薦使用碧云天的BCA蛋白濃度測定試劑盒。
5.Bradford蛋白濃度測定試劑盒對樣品中各種物質(zhì)詳細(xì)的兼容性表，參見Bradford蛋白濃度測定兼容性表。
Ø 每個試劑盒可以檢測1000個樣品。

Bradford蛋白濃度測定試劑盒使用說明：
1. *溶解蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，取10ml稀釋100ml ，使終濃度為0.5mg/ml。蛋白樣品在什么溶液中，標(biāo)準(zhǔn)品也宜用什么溶液稀釋。
但是為了簡便起見，也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 將標(biāo)準(zhǔn)品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20微升分別加到96孔板中，加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補足到20微升。
3. 加適當(dāng)體積樣品到96孔板的樣品孔中，加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液到20微升。
4. 各孔加入200微升G250染色液，室溫放置3-5分鐘。
5. 用酶標(biāo)儀測定A595，或560-610nm之間的其它波長的吸光度。
6. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中的蛋白濃度。

Bradford蛋白濃度測定試劑盒注意事項： 
1. G250染色液使用前請顛倒3-5次，混勻。
2.蛋白標(biāo)準(zhǔn)請在全部溶解后先混勻，再稀釋成一系列不同濃度的蛋白標(biāo)準(zhǔn)。
3.由于 Bradford方法本身的局限性，得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線只是在一定范圍內(nèi)可以近似看成直線，要得到更為的蛋白濃度結(jié)果，可以參照實際測得的標(biāo)準(zhǔn)曲線大致計算出較為的蛋白濃度。
4.將G250染色液回復(fù)到室溫再使用，有利于提高檢測的靈敏度。
5.需可檢測560-610nm之間波長的酶標(biāo)儀一臺，佳檢測波長為595nm。并需96孔板。如果沒有酶標(biāo)儀，也可以使用普通的分光光度計測定，但是測定蛋白濃度時，需根據(jù)測定吸光度的杯子的體積，按比例調(diào)整G250 染色液和樣品的體積。使用分光光度計測定蛋白濃度時，每個試劑盒可以測定的樣品數(shù)量可能會顯著減少。
6.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。