elisa酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)直接法和間接法優(yōu)缺點(diǎn)比較

因?yàn)镋LISA酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題 ，它是一種特殊的試劑分析方法。

elisa可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑：
（1）固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent)；
（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate)；
（3）酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,可設(shè)計(jì)出各種不類型的檢測(cè)方法。
elisa可根據(jù)抗原抗體的結(jié)合情況來分類為以下兩種方法。
直接法（direct elisa）
將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體，即可測(cè)定抗原總量，此一級(jí)抗體的特異性非常重要。
優(yōu)勢(shì)：操作手續(xù)簡(jiǎn)短，因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
缺點(diǎn)：試驗(yàn)中的一抗都得用酶標(biāo)記，但不是每種抗體都適合做標(biāo)記，費(fèi)用相對(duì)提高。
間接法（indirect elisa）
此測(cè)定方法與直接法類似，差別在于一級(jí)抗體沒有酶標(biāo)記，改用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測(cè)定抗原量。
優(yōu)勢(shì)：二抗可以加強(qiáng)信號(hào)，而且有多種選擇能做不同的測(cè)定分析。不加酶標(biāo)記的一級(jí)抗體則能保留它多的免疫反應(yīng)性。
缺點(diǎn)：交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高。