elisa間接法原理及實(shí)驗(yàn)步驟

  ELISA實(shí)驗(yàn)中文酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?？捎糜跍y定抗原，也可用于測定抗體。間接法是多種實(shí)驗(yàn)方法中常用方法。elisa間接法原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。

elisa間接法操作步驟如下：

  （1）將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗原：洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。

  （2）加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合，在洗滌過程中被洗去。

  （3）加酶標(biāo)抗抗體：與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合，從而使該抗體間接地標(biāo)記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體，可用酶標(biāo)羊抗人IgG抗體。

  （4）加底物顯色：顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體的量。

  elisa間接法法只要更換不同的固相抗原，可以用一種酶標(biāo)抗抗體檢測各種與抗原相應(yīng)的抗體。