木瓜蛋白酶的提取方法

木瓜蛋白酶（Papain）簡稱木瓜酶，又稱為木瓜酵素。是利用未成熟的番木瓜（Carica papaya）果實中的乳汁，采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)提煉而成的生物酶制品。木瓜蛋白酶主要作用：食品加工、醫(yī)藥使用、日化洗滌、飼料加工、皮革 和紡織等行業(yè)；以未成熟的番木瓜乳液為原料，經(jīng)過生物提取、微濾、冷凍、干燥提煉而成的酶制劑。
木瓜蛋白酶的提取方法：（僅供參考）
由木瓜的未成熟果實，經(jīng)提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工業(yè)上以粗制品的應(yīng)用為主。木瓜蛋白酶韻生產(chǎn)方法有三種，分別是直接熱風(fēng)烘干法、噴霧干燥法及膜分離凍干法。
直接烘干
生產(chǎn)方法較簡單、快速，但生產(chǎn)出來的成品只是粗酶，雜質(zhì)多、色澤差且微生物超標(biāo)，酶活力也較低，只有60萬～80萬單位/g。多為個體工廠采用，已不能滿足國內(nèi)食品質(zhì)量衛(wèi)生安全等。
噴霧干燥
此法是先通過離心去除部分雜質(zhì)后再進(jìn)行噴霧干燥，所生產(chǎn)出的成品酶活力相對高，達(dá)到100萬單位/g左右，雜質(zhì)相對也較少，色澤相對也較白。但產(chǎn)品噴霧時容易粘壁，酶活損失較大，水溶性相對也較差，而且酶活穩(wěn)定性也較差。
膜分離法
該生產(chǎn)方法不但避免了以上兩種方法的缺點，且生產(chǎn)過程衛(wèi)生安全，收率也高，所生產(chǎn)的成品酶活損失小，酶活力一般可達(dá)到280萬～350萬單位/g，高可達(dá)400萬單位/g，且酶活穩(wěn)定性好，純度高，色澤潔白，細(xì)菌數(shù)低，嚴(yán)格操作可達(dá)到醫(yī)藥。
其提取工藝條件為超聲波功率300W，超聲處理時間200s，果漿質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%；經(jīng)超聲波強(qiáng)化提取，酶活力提高到原先的1.71倍；該酶在40℃以下，pH為5.4～6.0時酶活力相對穩(wěn)定；EDTA、Cys和維生素C對酶活力具有激活作用，CuS04和ZnCl2具有抑制作用，而KCl、NaCI、CaCl2、MgS04對酶活力的影響不大。
木瓜蛋白酶的分離純化工藝：采用初步采集處理，20%、40%硫酸銨分級沉淀、SP-sephadexC50柱色譜、羥基磷灰石柱色譜，從番木瓜乳汁中分離純化木瓜蛋白酶?？色@得比活為1184U/mg的純酶，活力回收率為55.79%，純度達(dá)到99.31%，為高純度的木瓜蛋白酶。
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