嘌呤霉素的作用有哪些

嘌呤霉素(puromycin;PM ) 是一種抗生素，廣泛用作蛋白質(zhì)合成的抑制劑。其結(jié)構(gòu)與氨酰tRNA 3′端上的AMP結(jié)構(gòu)相似，肽酰轉(zhuǎn)移酶能促使氨基酸與嘌呤霉素結(jié)合形成肽酰嘌呤霉素，從核糖體上脫落，從而使蛋白質(zhì)合成反應(yīng)中斷。嘌呤霉素的作用如下：

嘌呤霉素的作用：

嘌呤霉素（Puromycin）是由白黑鏈霉菌（Streptomyces alboniger）發(fā)酵代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素，嘌呤霉素Puromycin通過抑制蛋白質(zhì)合成而殺死革蘭氏陽性菌，各種動物和昆蟲細胞。嘌呤霉素Puromycin某種特殊情況下有效作用大腸桿菌。嘌呤霉素Puromycin作為氨酰-tRNA分子3’末端的類似物，能夠與核糖體的A位點結(jié)合并摻入到延伸的肽鏈中。但是嘌呤霉素同A位點結(jié)合后，不會參與隨后的任何反應(yīng)，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成的提前止并釋放出C-末端含有嘌呤霉素的不成熟多肽。

嘌呤霉素Puromycin抗性基因：

對嘌呤霉素的抗性取決于編碼嘌呤霉素N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(PAC)的?Pac基因，遺傳工程研究使用的Pac基因分離自嘌呤霉素產(chǎn)生菌Streptomycesalboniger。

嘌呤霉素Puromycin普遍應(yīng)用：

1）嘌呤霉素作用于篩選和維持培養(yǎng)含Pac基因的哺乳動物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞。嘌呤霉素在細胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選中的普遍應(yīng)用與慢病毒載體的特性有關(guān)，現(xiàn)在商業(yè)化的慢病毒載體多數(shù)都攜帶pac基因。

2）在某些特定情況下，嘌呤霉素亦可以用來篩選轉(zhuǎn)化攜帶pac基因質(zhì)粒的大腸桿菌菌株。

化學(xué)特性：化學(xué)名稱：

3(a-Amino-p-methoxyhydro?cinnamamido)-3–deoxy-N,N–dimethyladenosine·2HClCAS

No.：58-58.2，

分子式：C22H29N7O5.2HCl，

分子量：544.43g/mo

純度：＞98%（HPLC）,易溶于水5-50mg/mL，-20度保存。

嘌呤霉素Puromycin應(yīng)用濃度：哺乳動物細胞的推薦使用濃度為1-10?μg/mL，佳濃度需要殺滅曲線來確定。LB瓊脂培養(yǎng)基篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)化pac基因的大腸桿菌，使用濃度為125μg/mL。使用嘌呤霉素篩選大腸桿菌穩(wěn)轉(zhuǎn)株需要的pH值調(diào)節(jié)，而且受宿主細胞本身的影響。

嘌呤霉素可由白色鏈球菌（Streptomyces.alboniger）發(fā)酵制得的抗生素。熔點175.5～177.0℃。旋光度-11 （乙醇）。在酸性溶液中分解成為6-二甲胺嘌呤，O-甲基-L-酷氨酸及3-氨基-3-去氧核糖。結(jié)構(gòu)與氨基酰tRNA分子中腺苷相連結(jié)的氨基酸末端基因相似，因而它可作氨基酰tRNA的類似物，從而取代一些氨基酰tRNA進入核糖體的A位與正在延伸的多肽鏈結(jié)合，當(dāng)延長中的肽轉(zhuǎn)入此異常A位時，容易脫落，以肽基嘌呤霉素的形式從核糖核蛋白體上早期解離,終止肽鏈合成,從而抑制了蛋白質(zhì)的合成。由于嘌呤霉素對原核和真核生物的翻譯過程均有干擾作用，故難于用做抗菌藥物，嘌呤霉素作用于研究蛋白質(zhì)合成的生物化學(xué)工具。有人試用于腫瘤治療。