瑞氏染色的注意事項有哪些

 瑞氏染色法是從經典和常用的染色法。 是染料透入被染物并存留其內部的一種過程，此過程既有物理的吸附作用，又有化學的親和作用，各種細胞成分化學性質不同，對各種染料的親和力也不一樣。因此，染色后同一血片上各種細胞可以染上各自特征性的顏色。 在瑞氏染色的過程中也有一些注意事項。

    瑞氏染色的注意事項

    1.血涂片干透后固定，否則細胞在染色過程中容易脫落。

    2.沖洗時應以流水沖洗，不能先倒掉染液，以防染料沉著在血涂片上。沖洗時間不能過久，以防脫色。如血涂片上有染料顆粒沉積，可滴加甲醇，然后立即用流水沖洗。

    3.染色過淡可以復染，復染時應先加緩沖液，然后加染液。染色過深可用流水沖洗或浸泡，也可用甲醇脫色。

    4.瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇（AR級以上）和甘油組成，Ⅱ液為磷酸鹽緩沖液（pH6.4～pH6.8）。

    5.由于蛋白質系兩性電解質，所帶電荷隨溶液pH而定，在偏酸性環(huán)境中下正電荷增多，易與伊紅結合，染色偏紅；在偏堿性環(huán)境中負電荷增多，易與美藍或天青結合，染色偏藍。

    6. PH對細胞染色有影響。由于細胞中各種蛋白均為兩性電解質，所帶電荷隨溶液PH而定。對某一蛋白質而言，如環(huán)境PH使用清潔中性的玻璃片，稀釋液必須用PH6.4～6.8的確良緩沖液。沖洗玻片必須用流水。

    7.未干透的血膜不能染色，否則染色時血膜易脫落。

    8.染色時間與染液濃度、染色溫度成反比；而與細胞數量成正比。

    9.如血膜上有染料顆粒沉積，可加少許甲醇溶解，但需立即用水沖洗掉甲醇，以免脫色。

    10. 染色過淡，可以復染。復染時應先加緩沖液，創(chuàng)造良好的染色環(huán)境，而后加染液，或加染液與緩沖液的混合液，不可先加染液。

    11.染色過深可用水沖洗或浸泡水中一定時間，也可用甲醇脫色。

    12.染色偏酸或偏堿時，均應更換緩沖液再重染。

    以上為瑞士染色的注意事項，由于瑞士染液系中性染料，又有緩沖液調節(jié)酸堿度，所以細胞受染后，藍紅等顏色都較適中，核染質、胞漿及其中之顆粒顯色較為清楚。