細(xì)胞培養(yǎng)血清的作用及分類

血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,具有極為重要的功能.

細(xì)胞培養(yǎng)血清的作用

1.在細(xì)胞培養(yǎng)中提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物.

2. 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力.

3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用.

4.在細(xì)胞培養(yǎng)中是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源.

5.起酸堿度緩沖液作用.

6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,在細(xì)胞培養(yǎng)中保護(hù)細(xì)胞不受傷害.

血清的類別：

胎牛血清、透析型胎牛血清 、天然低IGG胎牛血清 、干細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清 、特殊用途胎牛血清 、活性炭/葡萄糖處理胎牛血清 、胎牛血清替代物 、小牛血清 、新生牛血清 、加強型小牛血清 、補鐵小牛血清 、成牛血清 、供體馬血清 、兔血清 、雞血清 、豬血清 、馬血清 、其他動物血清 、合成血清替代品。

血清的常見問題

保存血清好的方法?

血清應(yīng)保存在-5C-2OC。然而，若存放于4C時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議將無菌分裝血清恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。 [5]

如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8C冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。[5]

如何避免沉淀物的產(chǎn)生?

1、解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C4。C室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C37。C)，實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

2、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生

3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。

4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。

5、若必須做血清的熱滅活，請遵守56。C，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。

6、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?

欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞過濾膜。