尼氏染色液100ml

尼氏染色液使用說明：
1. 樣品處理
   a) 對(duì)于石蠟切片：
      二甲苯中脫蠟5-10分鐘，共三次。注：脫蠟不充分會(huì)導(dǎo)致染色不均勻。
      無水乙醇5分鐘。
      90%乙醇2分鐘。
      70%乙醇2分鐘。
      蒸餾水2分鐘。
   b) 對(duì)于冰凍切片：
      蒸餾水2分鐘。
   c) 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞：
      用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。
      蒸餾水洗滌2分鐘。
      換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。
2. 尼氏(Nissl)染色
    對(duì)于上述處理好的樣品：
    尼氏(Nissl)染色液染色染色3-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間，染色時(shí)溫度提高到37-
50℃對(duì)于25-50微米等較厚的切片可以使染色更均勻）。
    蒸餾水洗滌2次(每次數(shù)秒鐘即可)。
    95%乙醇約5秒。
    此時(shí)，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙
醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。
    注：如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染，可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進(jìn)行尼氏(Nissl)
染色。
3. 脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色
   a) 脫水、透明、封片：
      95%乙醇脫水2分鐘。
      換用新鮮的95%乙醇再脫水2分鐘。
      二甲苯透明5分鐘。
      換用新鮮的二甲苯，再透明5分鐘。
      用中性樹膠或其它封片劑封片。
      顯微鏡下觀察，細(xì)胞呈現(xiàn)斑駁的藍(lán)紫色染色。
   b) 進(jìn)行其它染色：
      如果進(jìn)行免疫熒光染色，或進(jìn)行Hoechst等熒光染料的染色，在Nissl染色液染色后：
      70%乙醇洗滌2次，每次2分鐘。
      PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。
      然后就可以進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。