堿性磷酸酶染色液 （偶氮偶聯(lián)法）

堿性磷酸酶染色液 （偶氮偶聯(lián)法）
產(chǎn)品簡介 ：
堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase，簡稱 ALP 或 AKP）為一類磷酸酯酶，廣泛分布于哺乳動(dòng)物組織內(nèi)，其活性所需適 PH 9.2-9.8。 此酶主要存在于物質(zhì)交換活躍之處（細(xì)胞膜），如腸上皮和腎近曲小管的刷狀緣、 附睪上皮之靜纖毛、 肝的毛細(xì)膽管膜以及微動(dòng)脈和毛細(xì)血
管動(dòng)脈部之內(nèi)皮，還見于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、吞飲小泡、腸上皮溶酶體、中性粒細(xì)胞
之中性顆粒以及平滑肌之細(xì)胞膜。
堿性磷酸酶染色液（偶氮偶聯(lián)法）不是采用金屬沉淀法來顯示堿性磷酸酶活性，而是采用偶氮偶聯(lián)法（又稱同時(shí)偶聯(lián)法） ，其原理是在 PH 9.2-9.8 的堿性條件下，細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶可使 AB-BI 磷酸鹽水解，釋放出磷酸和萘酚，后者與偶聯(lián)重氮鹽生成有色產(chǎn)物，定位于細(xì)胞質(zhì)中。該染液專門用于血液、骨髓或細(xì)胞涂片、冰凍切片、梯度入水后的石蠟切片等的堿性磷酸酶染色，堿性磷酸酶活性部位呈紅色，位于胞漿，結(jié)果較金屬鹽沉淀法可靠。
產(chǎn)品組成 ：
名稱 規(guī)格  4×10ml  4×20ml  Storage
試劑(A): ALP 固定液  10ml  20ml  RT 避光
B1:AS-BI 染色液  5ml  10ml -20℃ 避光 試劑(B):ALP 孵育液
B2:FBB 染色液  5ml  10ml  4℃ 避光
臨用時(shí)，取 B1:B2 =1:1 比例混合，即為 ALP 孵育液，即配即用。
試劑(C): 蘇木素染色液  10ml 20ml 4℃ 避光
試劑(D):甲基綠染色液  10ml  20ml RT 避光
使用說明書  1 份
準(zhǔn)備材料 ：
1、載玻片、濕盒
2、普通光學(xué)顯微鏡
操作步驟 （ 僅供參考 ）：
1、 血液、骨髓或細(xì)胞涂片、冰凍切片、石蠟切片入 ALP 固定液固定 3min（梯度入水后的
石蠟切片無固定） ，水洗。
2、滴加配置好的 ALP 孵育液，放入濕盒中，避光孵育 15-20min，水洗。
3、蘇木素染色液復(fù)染 5-8min 或甲基綠染色液復(fù)染 3-5min。
4、水洗、鏡檢或甘油明膠封固后鏡檢。
染色結(jié)果 ：
普通光學(xué)顯微鏡:
ALP 活性部位  紅色
細(xì)胞核  藍(lán)色（蘇木素）或綠色（甲基綠）
血液、骨髓涂片結(jié)果判斷：
細(xì)胞分值  染色特點(diǎn)
0  無顆粒
1  稍有顆粒
2  中等程度顆粒
3  多數(shù)顆粒
4  充滿顆粒
臨床意義：
1、 類白血病反應(yīng)積分明顯增高，未經(jīng)治療的慢性粒細(xì)胞白血病積分明顯減低。
2、 急性細(xì)菌性感染積分明顯增高，病毒性感染積分多正?；驕p低。
3、 再生障礙性貧血積分常增高，PNH、MDS 積分常減低。
注意事項(xiàng) ：
1、血液或骨髓細(xì)胞涂片或其他樣本均應(yīng)新鮮，厚薄適宜，及時(shí)固定，否則會(huì)影響酶的活性。
2、ALP 孵育液易失效或降低陽性強(qiáng)度，即配即用，不宜久置。
3、復(fù)染時(shí)，蘇木素染色液或甲基綠染色液二者取其一。
4、每次染色時(shí)，應(yīng)有陽性對(duì)照片。
5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期 ：6 個(gè)月