蛋白酶K

蛋白酶K
貨號(hào)：1245680100
規(guī)格：100mg/瓶
英文名稱(chēng)：Proteinase K
CAS：39450-01-6
儲(chǔ)存條件：-20℃
外觀（性狀）：凍干粉
單位：瓶

說(shuō)明：枯草蛋白酶類(lèi)高活性蛋白酶，生物實(shí)驗(yàn)室常用酶之一。該酶在較廣的pH范圍內(nèi)(pH4-12.5)均有活性。用于mRNA和DNA與蛋白質(zhì)的分離。

活力：40mAnsom u/mg

     性狀：粉末，是一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶，來(lái)源于白色念球菌（. Tritirachium album. ），具有很高的比活性。EDTA等鰲合劑或SDS等去垢劑不能使蛋白酶K失活，反而增強(qiáng)和穩(wěn)定酶活性，并在較廣的PH范圍內(nèi)（PH4-12.5）均有活性。在組織或細(xì)胞核酸分離時(shí)，使核酸酶（RNA和DNA）以及反應(yīng)中其他酶失活。

     用途：生化研究。廣譜蛋白酶，95C加熱10分鐘，則*失活。可替代DEPC處理RNA抽提用的離心管和 頭，實(shí)現(xiàn)滅活RNase A的目的，也用于處理RNase-Free的水。充分降解組織或細(xì)胞中蛋白質(zhì)分子特別是核酸，以達(dá)到釋放和萃取高質(zhì)量核酸的輔助試劑。用于質(zhì)?；蚧蚪MDNA、RNA的分離以及蛋白多肽印跡實(shí)驗(yàn)。

     蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類(lèi)的高活性蛋白酶，用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。從林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中純化得到。該酶有兩個(gè)ca2+結(jié)合位點(diǎn)，它們離酶的活性中心有一定距離，與催化機(jī)理并無(wú)直接關(guān)系。然而，如果從該酶中除去ca2+，由于出現(xiàn)遠(yuǎn)程的結(jié)構(gòu)變化，催化活性將喪失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質(zhì)。所以，蛋白酶k消化過(guò)程中通常加入edta（以抑制依賴(lài)于mg2+的核酸酶的作用）。但是，如果要消化對(duì)蛋白酶k具有較強(qiáng)耐性的蛋白，如角蛋白一類(lèi)，則可能需要使用含有1mmol/l ca2+而不含edta的緩沖液。在消化完畢后、純化核酸前要加入EGTA（ph8.0）終濃度為2mmol/l,以鰲合ca2+。

    蛋白酶K，是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩(wěn)定，還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力，因而它應(yīng)用很廣泛，包括制備脈沖電泳的染色體DNA，蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH范圍內(nèi)（pH 4-12.5）均有活性。

     推薦反應(yīng)緩沖液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。

     蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)：20mg/ml蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)（proteinase K）：將200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中，輕輕搖動(dòng)，直蛋白酶K*溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。

蛋白酶k的作用
    值得注意的是，蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用,以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì),提高雜交信號(hào).但蛋白酶K的濃度過(guò)高、消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或孵育溫度過(guò)高時(shí),都會(huì)對(duì)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞,導(dǎo)致組織切片的脫落,細(xì)胞核的消失,從而影響雜交結(jié)果.EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用,解決上述出現(xiàn)的問(wèn)題,并能達(dá)到理想的染色效果.

    孵育溫度為5565℃，理想孵育溫度為58℃，孵育時(shí)間為15分鐘48小時(shí)；理想孵育時(shí)間為2小時(shí)。

蛋白酶K訂購(gòu)說(shuō)明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

運(yùn)輸說(shuō)明：

1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。