PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix （不含染料）

PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix （不含染料）
貨號(hào)：PC1350 
規(guī)格 ：500U/1000U
濃度 ：5U/ul
保存 ：-20℃保存, 有效期少一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介 ：
     Pfu DNA Ploymerase 是從克隆有 Pyrococcus furiosis DNA Ploymerase 基因的大腸桿菌中表達(dá)并經(jīng)過(guò)柱純化分離出來(lái)的重組蛋白，其分子量為 90kD。由于 Pfu 酶具有 3’→5’核酸外切酶活性，它能糾正 DNA 擴(kuò)增過(guò)程中產(chǎn)生的錯(cuò)配，而傳統(tǒng)的 Taq 酶卻不能，其它耐熱 DNA Polymerase 如 Vent、Deep Vent、Tli、UITma 等雖具有校正功能， 但 Pfu 酶是目前已發(fā)現(xiàn)的所有耐熱 DNA Polymerase 中出錯(cuò)率低的。 Pfu 酶無(wú) 5’→3’核酸外切酶活性，PCR 反應(yīng)中的延伸速度一般為 0.5-1kb/min，比 Taq 酶要低。Pfu 酶比 Taq 酶熱穩(wěn)定性更好，95 1 ℃ 小時(shí)仍保持90%以上的活性，對(duì)于 GC 含量很高的模板，變性溫度可以提高到 98℃而不影響其活性。Pfu 酶的 PCR 產(chǎn)物為平末端，可加 A 處理再與 T-載體連接或使用平末端克隆載體。

活性定義 ：
    1 單位(U) Pfu DNA Polymerase 活力定義為在 74℃，30 分鐘內(nèi)，以活性化的大馬哈魚精子 DNA 作為模板/引物，將 10 nmol 脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。

質(zhì)量控制 ：
    SDS-PAGE 檢測(cè) Pfu DNA Polymerase 純度大于 99%； 經(jīng)檢測(cè)無(wú)外源核酸酶活性； PCR 方法檢測(cè)無(wú)宿主殘余DNA；能有效地?cái)U(kuò)增人類基因組中的單拷貝基因；室溫存放一周，無(wú)明顯活性改變。

酶貯存緩沖液 ：
    50mM Tris-HCl (pH 8.2); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50% glycerol；其他成份。

適用范圍 ：
    用于 DNA 的高保真擴(kuò)增，如基因表達(dá)克隆、基因定點(diǎn)突變、細(xì)胞內(nèi)基因點(diǎn)突變的分析（SNP）和末端補(bǔ)平等。
    建議 PCR 體系（以 50µl 反應(yīng)體系為例）

Template <0.5µg
上游引物（10µM）  1µl
下游引物（10µM）  1µl
10×Buffer（含 Mg 2+ ） 5µl
dNTP（各 2.5mM）  4µl
Pfu DNA Polymerase  0.5-1µl
ddH2O up to 50µl

注意事項(xiàng) ：

1、PCR 反應(yīng)體系加樣時(shí)，后一步加入 Pfu DNA Ploymerase，整個(gè)過(guò)程宜在冰上操作。
2、取 Pfu DNA Ploymerase 做 PCR 反應(yīng)時(shí)，請(qǐng)用高壓滅菌處理過(guò)的吸頭。
3、10×Pfu Buffer 中含 20 mM Mg 2+ ，如 PCR 反應(yīng)需要較高 Mg 2+ 濃度，請(qǐng)另行加入。
4、 用Pfu酶擴(kuò)增時(shí)， 引物的純度要求較高， 引物長(zhǎng)度大于18個(gè)堿基， Tm值在55-80℃之間， 引物濃度在0.1-0.5uM之間，比 Taq 酶略高。

相關(guān)產(chǎn)品 ：

PC1320 2×Pfu PCR MasterMix ( 含染料）
PC2200 dNTPs Mix(10mM each)
D1020  10×DNA 上樣緩沖液
T1060  50×TAE  緩沖液
G8142  GoldView II 型核酸染色劑 (5000×)

PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix （不含染料）訂購(gòu)說(shuō)明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
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PCR試劑 2×Pfu PCR MasterMix （不含染料）運(yùn)輸說(shuō)明：

1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。