谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT/ALT）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
貨號：BC1550
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

產(chǎn)品說明：

谷丙轉(zhuǎn)氨酶又叫丙*酸氨基轉(zhuǎn)移酶（EC 2.6.1.2），廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化氨基酸和酮酸轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，在氨基酸代謝中具有重要作用。此外，哺乳動物肝細(xì)胞GPT活性很高，當(dāng)肝細(xì)胞壞死，GPT釋放到血液中，血清GPT活性顯著增高。因此，GPT被世界衛(wèi)生組織推薦為肝功能損害最敏感的檢測指標(biāo)。

GPT催化丙*酸和α-酮戊二酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，生成丙酮酸和谷*酸；加入2,4-二硝*肼溶液，不僅終止上述反應(yīng)，而且與酮酸中的羰基加成，生成丙酮酸苯腙；苯腙在堿性條件下呈紅棕色，可以在505nm讀取吸光值并計(jì)算酶活力。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g兔子肝臟組織加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后再按照測定步驟操作，測得A測定管=1.181，A對照管=0.458，計(jì)算?A =A測定管-A對照管=1.181-0.458=0.723，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.5286x+0.0362，計(jì)算x=（0.723-0.0362）÷0.5286=1.299，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：

GPT活性（U/g質(zhì)量）=12x÷W=12×1.299÷0.1=155.88 U/g質(zhì)量。

1. 取兔血清直接檢測，測得A測定管=0.514，A對照管=0.383，計(jì)算?A=A測定管-A對照管=0.514-0.383=0.131，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.5286x+0.0362，x=（0.131-0.0362）÷0.5286=0.179，按血清（漿）體積計(jì)算酶活得：

GPT活性（U/mL）=12x=12×0.179=2.148 U/mL。

參考文獻(xiàn)：

1. Zhao W, Wei H. Effects of cadmium on transaminase activities and structures of tissues in freshwater giant prawn (Macrobrachium rosenbergii) [J]. Journal of Fisheries of China, 1995,19(001):21-27.

2. Ohgami N, Upadhyay S, Kabata A, et al. Determination of the activities of glutamic oxaloacetic transaminase and glutamic pyruvic transaminase in a microfluidic system[J]. Biosensors and Bioelectronics, 2007, 22(7): 1330-1336.

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