胰*白酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

胰*白酶活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
貨號(hào)：BC2315
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：臨用前加入0.5mL蒸餾水，充分溶解；

2. 工作液的配制：將試劑一、試劑二按2：97配制工作液，按需配制，實(shí)驗(yàn)前置于37℃水浴預(yù)熱20min以上。

產(chǎn)品說(shuō)明：
胰*白酶選擇性水解變性蛋白質(zhì)中由賴氨酸或精*酸的羧基所構(gòu)成的肽鏈，是一種重要的消化酶。此外，胰*白酶還廣泛應(yīng)用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫及膿腫等的輔助治療。
胰*白酶催化水解BAEE的酯鍵，生成BA，BA在253nm處有吸收峰，通過(guò)測(cè)定253nm 吸光度增加速率，即可計(jì)算出胰*白酶的活性。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：

1. 實(shí)驗(yàn)前用1～2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，保證吸光值變化在0.01～0. 15之間（若使用96孔UV板，變化范圍在0.01-0.08之間）。

2. 若所測(cè)結(jié)果ΔA測(cè)定為負(fù)值，可適當(dāng)將試劑一稀釋（2倍或4倍）再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取1.25mg/mL胰*白酶溶液，按照測(cè)定步驟操作，使用96孔UV板測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=A4-A3=0.363-0.344=0.019，ΔA空白=A2-A1=0.325-0.324=0.001，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：

胰*白酶（U/mg prot）=2×10⁵×(ΔA測(cè)定-ΔA空白) ÷Cpr =2880 U/mg prot。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

1. Ren Zhang,Ruolun Wei,Wei Du,et al. Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA-593-5p to modulate human glioma growth via polo-like kinase 1. CNS Neuroscience & Therapeutics. March 2019;(IF4.458)

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