中性木聚糖酶活性檢測試劑盒 微量法

中性木聚糖酶（NEX）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2595
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
標準品：10mg木糖。臨用前加入667μL蒸餾水配成100μmol/mL的標準品溶液，2-8℃保存8周。
產(chǎn)品說明：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進有效物質的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進營養(yǎng)物質的吸收利用，因而廣泛的應用于釀造和飼料工業(yè)中，中性木聚糖酶（NEX）一般分離自最適生長pH為6-8的微生物。
NEX在中性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，在沸水浴條件下進一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應，在540nm處有特征吸收峰，反應液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，通過測定反應液在540nm吸光值增加速率，可計算NEX活力。


注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：
吸光度變化應該控制在0.01~1.5之間，否則加大樣本量或稀釋樣本，注意同步修改計算公式中的稀釋倍數(shù)。
實驗實例：

1. 取0.1090g橙子加入1mL緩沖液進行勻漿研磨，取上清用蒸餾水稀釋10倍后按照測定步驟操作，用96孔板測得ΔA測定=A測定- A對照=0.802-0.739=0.063，帶入標曲y=0.1859x-0.1003（R²=9968），計算x=0.8784，按樣本質量計算NEX活性得：NEX活力（U/g 質量）= x÷W÷30×F =0.8784÷0.1090÷30×10=2.6862 U/g 質量。

2. 取泡菜汁離心取上清按照測定步驟操作，用96孔板測得ΔA測定=A測定- A對照=0.782-0.167=0.615，帶入標曲y=0.1859x-0.1003（R²=9968），計算x=3.848，按發(fā)酵液計算NEX活力得：NEX活力（U/mL）= x÷T×F =3.848÷30×1=0.1283U/mL。 

相關系列產(chǎn)品：
BC2600/BC2605 酸性木聚糖酶（ACX）活性檢測試劑盒
BC3610/BC3615 堿性木聚糖酶（BAX）活性檢測試劑

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