酸性木聚糖酶活性檢測試劑盒 微量法

酸性木聚糖酶（ACX）活性檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC2605
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
1、標(biāo)準(zhǔn)品：10mg木糖。臨用前加入667μL緩沖液配成100μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，2-8℃保存8周。
產(chǎn)品說明：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中，酸性木聚糖酶（ACX）一般分離自耐酸的真菌，細(xì)菌及部分霉菌。
ACX在酸性環(huán)境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，進(jìn)一步在沸水浴條件下與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng)，在540nm處有特征吸收峰，反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，通過測定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率，可計(jì)算ACX活力。


注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、可調(diào)式移液槍、冰、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：
吸光度變化應(yīng)該控制在0.01~1.3之間，否則加大樣本量或稀釋樣本，注意同步修改計(jì)算公式中的稀釋倍數(shù)。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1079g藍(lán)莓加入1mL緩沖液進(jìn)行勻漿研磨，取上清用蒸餾水稀釋20倍后按照測定步驟操作，用96孔板測得ΔA測定=A測定- A對照=0.933-0.795=0.138，帶入標(biāo)曲y=0.2652x-0.0355（R²=0.9992），計(jì)算x=0.654，按樣本質(zhì)量計(jì)算ACX活性得：ACX活力（U/g 質(zhì)量）= x÷W÷30×F =0.654÷0.1079÷30×20=4.041 U/g 質(zhì)量。

2. 取泡菜汁離心取上清按照測定步驟操作，用96孔板測得ΔA測定=A測定- A對照=0.354-0.245=0.109，帶入標(biāo)曲y=0.2652x-0.0355（R²=0.9992），計(jì)算x=0.545，按發(fā)酵液計(jì)算ACX活力得：ACX活力（U/mL）= x÷T×F =0.545÷30×1=0.018U/mL。

相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC2590/BC2595 中性木聚糖酶（NEX）活性檢測試劑盒
BC3610/BC3615 堿性木聚糖酶（BAX）活性檢測試劑

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