堿性木聚糖酶活性檢測試劑盒 離子

堿性木聚糖酶（BAX）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴(yán)格按照該說明書操作。
貨號：BC3610
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品：10mg木糖。臨用前加入667μL蒸餾水配制成100μmol/mL的木糖標(biāo)準(zhǔn)液，2-8℃保存8周。

產(chǎn)品說明：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中，堿性木聚糖酶（BAX）一般分離自最適生長pH為9-11的微生物。
BAX在堿性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng)，在540nm處有特征吸收峰，反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，通過測定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率，可計算BAX活力。
注意：實(shí)驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、天平、低溫離心機(jī)、水浴鍋、研缽/勻漿器、蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項：
吸光度變化應(yīng)該控制在0.01~1.3之間，否則加大樣本量或稀釋樣本，注意同步修改計算公式中的稀釋倍數(shù)。
實(shí)驗實(shí)例：

1. 取0.1382g藍(lán)莓加入1mL緩沖液進(jìn)行勻漿研磨，取上清用蒸餾水稀釋40倍后按照測定步驟操作，用比色皿測得ΔA測定=A測定- A對照=0.660-0.561=0.099，帶入標(biāo)曲y=0.3396x-0.1615（R²=0.9988），計算x=0.767，按樣本質(zhì)量計算BAX活性得：BAX活力（U/g 質(zhì)量）= x÷W2÷30×F =0.767÷0.1382÷30×40=7.40 U/g 質(zhì)量。

2. 取泡菜汁離心取上清，用蒸餾水稀釋2倍后按照測定步驟操作，用比色皿測得ΔA測定=A測定- A對照=0.711 -0.116=0.595，帶入標(biāo)曲y=0.3396x-0.1615（R²=0.9988），計算x=2.228，按發(fā)酵液計算BAX活力得：BAX活力（U/mL）= x÷T×F =2.228÷30×2=0.149U/mL。

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