土壤芳基硫酸酯酶活性檢測試劑盒 微量法

土壤芳基硫酸酯酶（S-ASF）活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號(hào)：BC3995
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：甲苯自備；

2. 試劑三：臨用前取1瓶加入5mL蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑-20℃分裝保存一周，避免反復(fù)凍融；

3. 標(biāo)準(zhǔn)品：5mmol/L的對(duì)硝基 苯*溶液。臨用前用試劑二將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋50倍得100μmol/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。（具體稀釋過程見操作步驟）

產(chǎn)品說明：
土壤芳基硫酸酯酶來自于土壤微生物，能酶促土壤有機(jī)硫化物轉(zhuǎn)化為植物可吸收的無機(jī)態(tài)硫，在硫素的生物化學(xué)循環(huán)和植物的硫營養(yǎng)代謝中具有重要的作用，是反映土壤質(zhì)量的一個(gè)重要生物學(xué)指標(biāo)。

1. ASF能夠催化對(duì)-硝基 苯硫酸鉀生成對(duì)-硝基 苯*，后者在410nm有特征光吸收。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、研缽、冰、30-50目篩、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

三、S-ASF活力計(jì)算
單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1μmol對(duì)-硝基 苯*定義為一個(gè)酶活力單位。
S-ASF活力（U/g 土樣）=ΔA測定÷ (ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn))×V反總÷W÷T =0.456×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W
T：反應(yīng)時(shí)間，1h=1/24d；V反總：反應(yīng)體系總體積：1.9×10^-4L；C標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，100μmol/L；W：樣本質(zhì)量，g。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 分別稱取兩管0.02g三葉草土樣，分別記為測定管和對(duì)照管，按照測定步驟操作，用96孔板測得計(jì)算ΔA測定=A測定管-A對(duì)照管=0.401-0.076=0.325，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.395-0.047=0.348，計(jì)算酶活得：

S-ASF活力（U/g 土樣）=0.456×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.456× 0.325÷0.348÷0.02=21.293 U/g 土樣。

1. 分別稱取兩管0.02g土樣，分別記為測定管和對(duì)照管，按照測定步驟操作，用96孔板測得計(jì)算ΔA測定=A測定管-A對(duì)照管=0.262-0.066=0.196，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.395-0.047=0.348，計(jì)算酶活得：

S-ASF活力（U/g 土樣）=0.456×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.456× 0.196÷0.348÷0.02=12.841 U/g 土樣。
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