脲酶（UE）活性檢測試劑盒 微量法

脲酶（UE）活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC4115
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑一：臨用前加3mL蒸餾水充分溶解；

2. 試劑三：臨用前將A液倒入B液中混合，待用；

3. 標(biāo)準(zhǔn)品：1mg/mL氮標(biāo)準(zhǔn)液。用蒸餾水稀釋至2μg/mL備用。

產(chǎn)品說明：
脲酶（UE）廣泛分布于植物的種子中，也存在于動物的血液和尿液中，某些微生物也能分泌脲酶。UE能夠水解尿素產(chǎn)生氨和碳酸，對尿素轉(zhuǎn)化起關(guān)鍵作用。利用靛酚藍(lán)比色法測定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH₃-N來反應(yīng)UE活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、天平、研缽/勻漿器、低溫離心機(jī)、微量玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：
ΔA測定大于0.6時，建議將反應(yīng)混合液用蒸餾水稀釋或者樣本用蒸餾水稀釋后在進(jìn)行測定。

實驗實例：

1. 取0.1g綠豆加入1mL提取液進(jìn)行樣本處理，取上清后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算ΔA= A測定管-A對照管=0.152-0.092=0.047，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.241-0.041=0.200，按樣本質(zhì)量計算酶活得：UE活力（U/g質(zhì)量）=0.233×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.233×0.047÷0.2÷0.1=0.548 U/g質(zhì)量。

2. 取0.1g腎臟加入1mL提取液進(jìn)行樣本處理，取上清后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算ΔA= A測定管-A對照管=0.215-0.162=0.053，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.241-0.041=0.200，按樣本質(zhì)量計算酶活得：UE活力（U/g質(zhì)量）=0.233×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=0.233×0.053÷0.2÷0.1=0.6175 U/g質(zhì)量。

3. 取火雞血清20μL直接按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算計算ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A測定管-A對照管=0.145-0.097=0.048，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.241-0.041=0.200，按液體體積計算酶活得：UE活力（U/mL）=0.233×ΔA測定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)=0.233×0.048÷0.2=0.0559 U/mL。

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