維生素D3含量檢測試劑盒 微量法

維生素 D3 含量檢測試劑盒說明書

高效液相色譜法 

注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。 

貨號: BC4884 

規(guī)格:50T/48S 

產品簡介：維生素 D3 是一種脂溶性*生素。維生素 D3 的生物學功能與其代謝產物鈣三醇密切相關，主要功能包括提高機體對鈣和磷的吸收、促進新骨的生成及鈣化、調節(jié)肝臟中鈣結合蛋白質的合成等。維生素 D3 在 265 nm 處存在紫外吸收，可利用紫外檢測器測定其含量。 

試驗中所需的儀器和試劑：高效液相色譜儀（ZORBAX Extend C18 色譜柱（4.6×250 mm），紫外檢測器（VWD））、臺式離心機、可調式移液槍、研缽/勻漿器、混勻儀、EP 管、針頭式過濾器（有機系）、注射器、抽濾器、濾膜（水系、有機系）、棕色進樣瓶、超純水、甲醇（色譜純）。 

產品內容：提取液：液體 60 mL ×1 瓶，4℃保存。標準品：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加入 1 mL 甲醇配制成 5 mg/mL 維生素 D3 標準溶液，4℃密封保存，避免陽光直射。 

實驗前準備工作：1. 將甲醇（色譜純）用有機系濾膜抽濾。2. 將抽濾好的流動相超聲 20 min，除去氣泡。4. 標準品的配制：將 5 mg/mL 的維生素 D3 標準溶液用甲醇稀釋成 1000 μg/mL、500 μg/mL、100μg/mL、20 μg/mL、4 μg/mL、0.8 μg/mL 的維生素 D3 標準溶液。4℃避光保存（密封），測試前采用有機系針頭式過濾器過濾到棕色進樣瓶內，待測

注意事項 

1. 測試完畢后，需要用高濃度的超純水相清洗色譜柱（約 20-30 個柱體積），再用高濃度的有機相沖洗色譜柱，最后按柱子的種類規(guī)范沖洗，防止損傷色譜柱。

2. 標準品的稀釋倍數(shù)要根據樣品中維生素 D3 的濃度確定，樣品中維生素 D3 的濃度必須在標準品溶液的濃度范圍之內，該標準品的稀釋倍數(shù)只是一個參考。若樣本中維生素 D3 濃度過高，建議稀釋后再測。

3.  若樣本量過大，建議每天測試一次標準溶液（一個標準溶液即可），以確定相應的保留時間，待測溶液測試前須放置至室溫狀態(tài)。

4. 為了排除溶劑的影響，可進行一次空白檢測

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