土壤酸性蛋白酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

土壤酸性蛋白酶活
性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào)：BC0865
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前加入10 mL試劑六，沸水浴攪拌溶解后待用，用不完的試劑2-8℃保存1個(gè)月；

2. 標(biāo)準(zhǔn)品：20μmol/mL 酪*酸溶液。

產(chǎn)品說(shuō)明：
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化，其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。土壤酸性蛋白酶在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解，與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。酸性條件下，土壤酸性蛋白酶可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪*酸；在堿性條件下，酪*酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)，在680nm有特征吸收峰。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、研缽、蒸餾水、30-50目篩。

操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng)：
當(dāng)吸光值大于1.5時(shí)，建議將上清液用蒸餾水稀釋后進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算時(shí)注意乘以稀釋倍數(shù)。
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 分別稱取2份0.05g土樣于1.5mLEP管中，分別為對(duì)照管及測(cè)定管。按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)定吸光值，計(jì)算ΔA測(cè)定= A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.189-0.178=0.016，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.374-0.045=0.329，按土壤質(zhì)量計(jì)算酶活得：

土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)= 0.05×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W= 0.05×0.016÷0.329÷0.05= 0.0486 U/g土樣。

1. 分別稱取2份0.05g森林土于1.5mLEP管中，分別為對(duì)照管及測(cè)定管。按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)定吸光值，計(jì)算ΔA測(cè)定= A測(cè)定管-A對(duì)照管=0.831-0.612=0.219，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管=0.374-0.045=0.329，按土壤質(zhì)量計(jì)算酶活得：

土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)= 0.05×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W= 0.05×0.219÷0.329÷0.05= 0.6657 U/g土樣。
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0270/BC0275 土壤中*蛋白酶活性檢測(cè)試劑盒
BC0880/BC0885 土壤堿性蛋白酶（S-ALPT）活性檢測(cè)試劑盒
 

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