土壤羥胺還原酶（HR）檢測(cè)試劑盒

土壤羥胺還原酶（S-HR）活性檢
測(cè)試劑盒說(shuō)明書
可見分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書操作。
貨號(hào)：BC3010
規(guī)格：50T/24S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑二：臨用前取1瓶加入7.5mL蒸餾水充分溶解備用，用不完的試劑可以2-8℃保存一周；

2. 試劑三：臨用前沸水浴中加熱15min，開蓋10s后立即擰緊蓋子，待自然冷卻后再使用。使用過(guò)程中盡量不要敞口放置，取完立即加蓋擰緊。若長(zhǎng)期敞口放置，可再次沸水浴10min（蓋蓋兒）冷卻至常溫使用；

3. 試劑四：臨用前加30mL蒸餾水溶解，此溶液為飽和溶液，取上清使用即可。用不完的試劑2-8℃保存2周；

4. 標(biāo)準(zhǔn)品：臨用前加1.028mL蒸餾水充分溶解，制備140μmol/mL鹽酸羥胺標(biāo)準(zhǔn)溶液待用，2-8℃保存2周。

產(chǎn)品說(shuō)明：
土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過(guò)程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨，土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體，其強(qiáng)弱影響到土壤氮代謝過(guò)程中氮素的氨揮發(fā)損失，間接影響氮肥的利用效率。
硫酸鐵銨中的Fe³⁺可將羥胺氧化為氮?dú)?，自身被還原為Fe²⁺，F(xiàn)e²⁺在弱酸條件下與鄰菲羅啉形成橙紅色配合物，在510nm處有吸收峰，羥胺還原酶作用于羥胺，使配合物形成量減少，510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、天平、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、30-50目篩、漩渦震蕩儀、

氮吹儀、研缽、蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 分別稱取2管0.1g三葉草土，按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=（A無(wú)基質(zhì)管-A空白管）-（A測(cè)定管-A對(duì)照管）=0.603-（0.499-0.139）=0.243，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.1693x+0.0083，計(jì)算x=1.3863，按土壤質(zhì)量計(jì)算S-HR酶活得：

S-HR活性（U/g 土樣）=4.8×x÷W=4.8×1.3863÷0.1=66.542 U/g 土樣。

1. 分別稱取2管0.1g林土，按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=（A無(wú)基質(zhì)管-A空白管）-（A測(cè)定管-A對(duì)照管）=0.603-（0.543-0.199）=0.259，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線y=0.1693x+0.0083，計(jì)算x=1.4808，按土壤質(zhì)量計(jì)算S-HR酶活得：

S-HR活性（U/g 土樣）=4.8×x÷W=4.8×1.4808÷0.1=71.078 U/g 土樣。
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