過氧化氫測定盒 比色法

過氧化氫測定盒   比色法
貨號：BC3590
規(guī)格：50T/48S
試劑一：丙酮 100mL×1 瓶，4℃保存；（自備）
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入 6mL 濃鹽酸充分溶解備用。用不完的試劑 4℃保存；
試劑三：液體 12mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：液體 60mL×1 瓶，4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：液體 1mL×1 支，4℃保存。1mmol/mL H 2 O 2 標(biāo)準(zhǔn)液
H 2 O 2 是生物體內(nèi)常見的活性氧分子，主要由 SOD 和 XOD 等催化產(chǎn)生，由 CAT 和 POD 等催化降解。H 2 O 2 不僅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面，H 2 O 2 可以直接或間接地氧化細(xì)胞內(nèi)核酸，蛋白質(zhì)等生物大分子，并使細(xì)胞膜遭受損害，從而加速細(xì)胞的衰老和解體；另一方面 H 2 O 2 也是許多氧化應(yīng)急反應(yīng)中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。
H 2 O 2 與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復(fù)合物，在 415nm 有特征吸收。
可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL 玻璃比色皿、丙酮 100mL、濃鹽酸 5mL、
研缽和冰。

一、H 2 O 2 提取：
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備
收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 試劑一，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率 20％，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復(fù) 30 次）；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
2、組織樣品的制備
稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一進(jìn)行冰浴勻漿；8000g 4℃離心 10min，取全部上清液（注意吸取干凈），置冰上待測。
3、血清（漿）樣品
按照每 100μL 血清（漿）加入 1mL 試劑一的比例充分混勻。

注意事項：
1、由于試劑一易揮發(fā)，試劑一必須先預(yù)冷再加，研磨時必須在冰上研磨。
2、本試劑盒中試劑的揮發(fā)性較高，請帶一次性手套和口罩。

二、測定步驟和加樣表
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長 415nm，蒸餾水調(diào)零。
2、將試劑二、三和四 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴 10min 以上。
3、將 1mmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)液稀釋為 1μmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
4、在 EP 管中按順序加入下列試劑
試劑名稱  測定管  標(biāo)準(zhǔn)管  對照管
樣本  吸取的量為全部上清液 
1.25umol/mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液  1000 
試劑一  1000
試劑二  100  100  100
試劑三  200  200  200
4000g，常溫離心 10min，棄上清，留沉淀
試劑四  1000  1000  1000
加入試劑四溶解沉淀（可用丙酮清洗 3-5 次先洗去植物色素），室溫靜置 5min，倒入比色皿中，415nm 處，蒸餾水調(diào)零，記錄測定管吸光度。對照管只需做一次即可。計算?A 測定=A 測定管-A 對照管，?A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 對照管。

三、H 2 O 2 含量計算：
1、按照細(xì)菌、細(xì)胞個數(shù)計算：
細(xì)菌或細(xì)胞中 H 2 O 2 含量（μmol/10 4 細(xì)菌或細(xì)胞）=?A 測定÷（?A 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)液）×V 樣本÷(500×V樣本÷V 提取)=0.002×?A 測定÷?A 標(biāo)準(zhǔn)。
2、按組織鮮重計算：
組織中 H 2 O 2 含量（μmol/g 鮮重）=?A 測定÷（?A 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)液）×V 樣本÷(V 樣本÷V 提取×W)=?A 測定÷?A 標(biāo)準(zhǔn)÷W。
3、按照蛋白濃度計算：
H 2 O 2 含量（μmol/mg prot）＝?A 測定÷（?A 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)液）×V 樣本÷（Cpr×V 樣本）=?A 測定÷?A 標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr。
4、按血清（漿）體積計算：
血清（漿）中 H 2 O 2 含量 μmol/mL 血清（漿）＝?A 測定÷（?A 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)液）×V 樣本÷V 血清（漿）=10×?A 測定÷?A 標(biāo)準(zhǔn)。
500：細(xì)胞個數(shù)，以萬計；C 標(biāo)液：H 2 O 2 標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，1μmol/mL；V 樣本：加入的樣本體積，1mL；W：組織鮮重，g；V 提取：提取過程中所用體積，1mL；Cpr：樣品蛋白濃度，mg/mL；V血清（漿）：所用血清（漿）體積，0.1mL。

過氧化氫測定盒   比色法訂購說明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時間為16點整，部分城市可到17點整，因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后，將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

過氧化氫測定盒   比色法運輸說明：

極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護(hù)航。
低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護(hù)航。
常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。